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本周hzangs在最新文献中选取了11篇分享给大家，第1篇文章介绍了一种基于细胞外囊泡EGFR异构体D的鳞状细胞癌联合治疗策略；第2篇文章介绍了吞噬了菌体的巨噬细胞释放细胞外囊泡诱导坏死性凋亡；第3篇文章介绍了羊水干细胞来源囊泡可以促进胎儿肺成熟；第7篇文章介绍了含有线粒体的细胞外囊泡用于缺血性中风的治疗；第8篇文章综述了细胞外囊泡蛋白用于肿瘤诊断。

1.Therapeutic application of extracellular vesicular EGFR isoform D as a co-drug to target squamous cell cancers with tyrosine kinase inhibitors.

细胞外囊泡 EGFR 异构体 D 作为辅助药物与酪氨酸激酶抑制剂一起用于治疗鳞状细胞癌。

[Dev Cell] PMID: 39089249

摘要：使用酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 靶向野生型表皮生长因子受体 (EGFR) 从未在头颈部鳞状细胞癌等癌症中取得其所谓的成功，这些癌症在很大程度上依赖于 EGFR。我们之前曾表明，对 TKI 有特殊反应的患者具有遗传畸变，导致 EGFR 剪接变体异构体 D (IsoD) 过度表达。IsoD 缺乏完整的跨膜和激酶结构域，并在 TKI 敏感的患者来源培养物中分泌到细胞外囊泡 (EV) 中。值得注意的是，对 TKI 的极度敏感性可以转移到 TKI 耐药性肿瘤细胞中，EV 中的IsoD 蛋白是体外和体内跨多种模型和药物转移表型的必要和充分条件。这种药物反应需要完整的内吞机制、与全长EGFR 结合以及通过内体区室中的 Src 磷酸化发出信号。我们提出了一种治疗策略，即使用含有 EGFR IsoD 的 EV 作为辅助药物，以扩大 TKI 治疗对 EGFR 驱动的癌症的使用范围。

2.Extracellular vesicles from alveolar macrophages harboring phagocytosed methicillin-resistant Staphylococcus aureus induce necroptosis. 

吞噬耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的肺泡巨噬细胞来源细胞外囊泡会诱导坏死性凋亡。

[Cell Rep] PMID: 38985677

摘要：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 感染是医院内和社区获得性肺炎的主要原因，死亡率仍然很高。细胞外囊泡(EV) 作为细胞间通讯的重要介质，对传染病有重要影响。然而，肺泡巨噬细胞 (AM) 中的 EV 在 MRSA 肺炎中的作用仍不清楚。我们报道 AM 吞噬 MRSA 并在患有MRSA 肺炎的小鼠中释放更多的 EV。含有吞噬 MRSA 的 AM 中的 EV 表现出显着的促炎作用并通过递送肿瘤坏死因子 α (TNF-α) 和miR-146a-5p 诱导坏死性凋亡。从机制上看，这些 EV 中上调的 miR-146a-5p 通过靶向 TNF 受体相关因子 6 (TRAF6) 增强 RIPK1、RIPK3和 MLKL 的磷酸化，从而促进 TNF-α 诱导的坏死性凋亡。TNF-α 拮抗剂和 miR-146a-5p 拮抗剂的组合可有效改善 MRSA 肺炎小鼠的预后。总体而言，我们揭示了 MRSA 感染 AM 中 EV 的促坏死作用，并为预防和治疗 MRSA 肺炎提供了有希望的靶点。

3.Fetal hypoplastic lungs have multilineage inflammation that is reversed by amniotic fluid stem cell extracellular vesicle treatment. 

胎儿发育不全肺具有多谱系炎症，可通过羊水干细胞细胞外囊泡治疗逆转。

[Sci Adv] PMID: 39058789

摘要：产前注射羊水干细胞的细胞外囊泡 (AFSC-EVs) 可逆转先天性膈疝 (CDH) 模型中的肺发育不全特征。然而，哪些肺细胞区室和生物途径受到 AFSC-EV 疗法的影响仍不清楚。在此，我们对用载体或 AFSC-EVs 治疗的大鼠胎儿 CDH 肺进行了单核 RNA 测序(snRNA-seq)。我们发现，羊膜内注射的 AFSC-EVs 到达患有 CDH 的大鼠的胎儿肺，在那里它们促进肺分支形态发生和上皮细胞分化。此外，snRNA-seq显示大鼠胎儿 CDH 肺具有多谱系炎症特征和巨噬细胞富集，而AFSC-EV 治疗可逆转这种特征。通过免疫荧光、流式细胞术和 GW2580 抑制研究证实了 CDH 胎儿大鼠肺中的巨噬细胞富集。此外，我们还验证了人类胎儿 CDH 肺尸检样本中巨噬细胞的富集情况。总之，这项研究增进了人们对肺发育不全发病机制的认识，并进一步证明了 EV 疗法对 CDH 胎儿的价值。

4.miR-203 secreted in extracellular vesicles mediates the communication between neural crest and placode cells required for trigeminal ganglia formation. 

分泌在细胞外囊泡中的 miR-203 介导三叉神经节形成所需的神经嵴细胞和斑块细胞之间的通讯。

[PLoS Biol] PMID: 39038054

摘要：虽然神经嵴细胞和斑块细胞之间的相互作用对于三叉神经节的正确形成至关重要，但这一过程背后的机制在很大程度上仍未得到明确。本文利用鸡胚，展示了微小RNA (miR)-203在融合和凝聚的三叉神经节细胞中被重新激活，而神经嵴细胞的表观遗传抑制是神经嵴迁移所必需的。miR-203的过度表达会诱导神经嵴细胞异位融合并增加神经节的大小。通过使用细胞特异性电穿孔进行miR-203海绵化或使用CRISPR/Cas9进行基因组编辑，我们阐明了神经嵴细胞是miR-203在三叉神经节凝聚中的来源，而斑块细胞是miR-203的作用位点。通过展示细胞间通讯，体外或体内神经嵴中 miR-203 的过度表达抑制了斑块细胞中 miR 响应传感器。此外，使用 pHluorin-CD63 载体可视化的神经嵴分泌的细胞外囊泡 (EV) 被整合到斑块细胞的细胞质中。最后，RT-PCR 分析表明，从凝聚的三叉神经节中分离出的小型 EV 选择性地装载了 miR-203。总之，我们的研究结果揭示了 sEV 及其选择性 microRNA 货物介导的神经嵴-斑块通讯在体内对三叉神经节的正确形成起着关键作用。

5.Hybrid hair follicle stem cell extracellular vesicles co-delivering finasteride and gold nanoparticles for androgenetic alopecia treatment. 

混合毛囊干细胞来源细胞外囊泡共同输送非那雄胺和金纳米粒子用于雄激素性脱发治疗。

[J Control Release] PMID: 39089503

摘要：雄激素性脱发 (AGA) 是一种全球范围内普遍存在的非致命性疾病。然而，在 AGA 患者中，不同的毛发生长疗法的疗效参差不齐。因此，通过毛囊干细胞 (HFSC) 衍生的细胞外囊泡和脂质体之间的膜融合，构建了一种基于包覆金纳米粒子(AuNPs) 和非那雄胺 (Hybrid/Au@Fi) 的混合细胞外囊泡的协同治疗纳米平台。这些混合囊泡 (HVs) 不仅通过在细胞外囊泡中提供细胞信号来促进毛发生长，而且还提高了抑制 5α-还原酶的非那雄胺和模拟具有类似光热效应的低强度激光疗法 (LLLT) 的纳米尺寸 AuNPs 的储存稳定性、毛囊保留和药物包封效率 (EE%)。这些 HV 中非那雄胺的 EE% 达到45.33%。这些细胞外囊泡和非那雄胺的双重给药在体外对 HFSC 表现出强烈的协同作用。在 AGA 小鼠模型中，与每日一次 5% 米诺地尔治疗相比，每日一次局部使用 Hybrid/Au@Fi（115.07 ± 0.32 nm，-7.50 ±1.68 mV）凝胶可使毛囊 (HF) 更快地从退化期转变为生长期，增加毛发再生覆盖率，并提高再生毛发的质量。与局部使用米诺地尔相比，通过局部给药进行 Hybrid/Au@Fi 的多方面协同疗法为难治性 AGA 患者提供了一种副作用较小的新选择。

6.Exosomal TNF-α mediates voltage-gated Na+ channels 1.6 overexpression and contributes to brain-tumor induced neuronal hyperexcitability. 

外泌体 TNF-α 介导电压门控 Na+ 通道 1.6 过度表达并导致脑肿瘤诱导的神经元兴奋性增加。

[J Clin Invest] PMID: 39088270

摘要：患有神经胶质瘤的患者经常会出现癫痫发作，但脑肿瘤相关癫痫 (BTRE) 的病因仍未完全了解。我们通过分析 U87 神经胶质瘤细胞和患者来源的神经胶质瘤细胞释放的外泌体的影响，研究了 BTRE 的潜在机制。用这些外泌体孵育 24 小时的大鼠海马神经元表现出自发放电增加，而其静息膜电位正向偏移 10-15 mV。电压钳记录表明，Na+ 电流的激活向更超极化的电压偏移 10-15 mV。为了了解诱导过度兴奋的因素，我们专注于外泌体细胞因子。Western Blot 和 ELISA 测定表明 TNF-α 存在于神经胶质瘤衍生的外泌体内。值得注意的是，与 TNF-α 一起孵育完全模仿了外泌体诱导的表型，神经元持续放电，而其静息膜电位正向移动。RT-PCR 表明，外泌体和 TNF-α 均诱导电压门控 Na 通道 Nav1.6 的过度表达，该通道是一种负责过度兴奋的低阈值 Na+ 通道。当神经元与特异性 TNF-α 抑制剂英夫利昔单抗一起预孵育时，外泌体和 TNF-α 诱导的过度兴奋显著降低。我们认为，FDA 批准用于治疗类风湿性关节炎的药物英夫利昔单抗可以改善患有 BTRE 的神经胶质瘤患者的病情。

7.Mitochondria-containing extracellular vesicles from mouse vs. human brain endothelial cells for ischemic stroke therapy. 

含有小鼠和人类脑内皮细胞的线粒体的细胞外囊泡可用于缺血性中风治疗。

[J Control Release] PMID: 39084466

摘要：缺血性中风引起的血脑屏障形成脑内皮细胞 (BEC) 线粒体功能障碍会导致中风后长期神经功能障碍。我们之前从一项试点研究中获得了数据，在该研究中，静脉注射人类 BEC (hBEC) 衍生的含有线粒体的细胞外囊泡 (EV) 在小鼠中脑动脉闭塞 (MCAo) 中风模型中显示出潜在的疗效信号。我们假设从与受体物种同源的供体物种（例如小鼠）中收获的 EV 可能会提高治疗效果，因此，使用小鼠 BEC (mBEC) 衍生的 EV 可能会改善 MCAo 小鼠的中风后结果。我们研究了来自与受体细胞相同物种的 EV（mBEC-EV 和受体 mBEC或 hBEC-EV 和受体 hBEC）与跨物种 EV 和受体细胞（mBEC-EV 和受体 hBEC 或反之亦然）的线粒体转移的潜在差异。我们的结果表明，虽然 hBEC 和 mBEC-EV 都转移了 EV 线粒体，但 mBEC-EV 在提高 ATP 水平和通过增加氧消耗率改善受体 mBEC 线粒体功能方面优于 hBEC-EV。与注射载体的 MCAo 小鼠相比，mBEC-EV 显着减少了脑梗塞体积和神经功能缺损评分。mBEC-EV 在小鼠 MCAo 中风中的卓越治疗效果支持继续使用 mBEC-EV 来优化含线粒体的 EV 在临床前小鼠模型中的治疗潜力。

8. Extracellular vesicles proteins for early cancer diagnosis: From omics to biomarkers. 

用于早期癌症诊断的细胞外囊泡蛋白：从组学到生物标志物。

[Semin Cancer Biol] PMID: 39074601

摘要：细胞外囊泡 (EV) 是癌症诊断的早期生物标志物的有希望的来源。它们富含各种分子内容，例如蛋白质、DNA、mRNA、miRNA、脂质和代谢物。EV蛋白已被广泛研究作为潜在的生物标志物，因为它们反映了特定的患者状况。然而，尽管许多标志物已经通过外部患者队列和不同的分析方法进行了验证和确认，但没有 EV 蛋白标志物被批准用于诊断用途。本综述介绍了使用质谱和基于免疫的技术来识别和验证EV 蛋白生物标志物的主要策略。我们报告并讨论了最近通过 EV 发现癌症生物标志物的科学研究，强调它们在几种癌症类型的临时诊断中具有巨大潜力。最后，通过开发易于使用和高通量的样品制备试剂盒，介绍了 EV 分离和定量标准化的最新进展——这应该会使蛋白质 EV 生物标志物更加可靠和易于获取。这里报告的数据表明，在蛋白质囊泡标记物成为诊断癌症的重要工具之前仍有几个挑战需要解决。

9.Macrophage-derived extracellular vesicles regulate skeletal stem/progenitor Cell lineage fate and bone deterioration in obesity. 

巨噬细胞衍生的细胞外囊泡调节骨骼干细胞/祖细胞谱系命运和肥胖中的骨质恶化。

[Bioact Mater] PMID: 39072285

摘要：肥胖引起的慢性炎症会加剧多种组织/器官退化和干细胞功能障碍；然而，对骨骼组织的影响和潜在机制仍不清楚。在这里，我们表明肥胖会触发巨噬细胞分泌的细胞外囊泡的 microRNA 谱的变化，导致骨骼干细胞/祖细胞 (SSPC) 分化为成骨细胞和脂肪细胞，并导致骨质退化。肥胖小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM) 分泌的细胞外囊泡 (BMM-EV) 在给瘦小鼠注射后会引起骨质退化（骨量减少、骨微结构退化和脂肪细胞数量增加）。相反，瘦小鼠的 BMM-EV 可使肥胖受体的骨质退化恢复活力。我们进一步筛选了肥胖BMM-EVs中差异表达的microRNA，发现候选miR-140（具有促进脂肪形成的功能）和miR-378a（具有增强成骨形成的功能）通过靶向Pparα-Abca1轴协同决定SSPC成骨和脂肪形成的分化命运。BMM miR-140条件性敲除小鼠对肥胖引起的骨质恶化表现出抵抗力，而SSPCs中miR-140的过表达导致瘦小鼠骨量低和骨髓脂肪沉积。小鼠BMM miR-378a条件性缺失导致肥胖样骨质恶化。更重要的是，我们使用SSPC特异性靶向适体，通过适体工程化的细胞外囊泡递送系统将miR-378a-3p过载的BMM-EVs精准递送至SSPCs，这种方法挽救了肥胖小鼠的骨质恶化。因此，我们的研究揭示了 BMMs 通过将选择性细胞外囊泡微小 RNA 运送到 SSPC 并控制 SSPC 命运在介导肥胖引起的骨质恶化中发挥的关键作用。

10.Exosomal miRNA-26b-5p from PRP suppresses NETs by targeting MMP-8 to promote diabetic wound healing.

PRP 中的外泌体 miRNA-26b-5p 通过靶向 MMP-8 来抑制 NET，从而促进糖尿病伤口愈合。

[J Control Release] PMID: 38909697

摘要：富含血小板的血浆 (PRP) 已被证明可以作为治疗糖尿病足溃疡 (DFU) 的治疗方法。然而，目前还不太了解糖尿病环境如何影响 PRP 衍生的外泌体 (PRP-Exos) 及其对中性粒细胞胞外陷阱 (NET) 的潜在影响。本研究旨在研究糖尿病环境对 PRP-Exos 的影响、它们与中性粒细胞的通讯以及对 NET 和伤口愈合的后续影响。通过批量测序和蛋白质印迹，我们证实了 DFU 中 MMP-8 的表达增加。此外，我们发现 miRNA-26b-5p 在 DFU 和 PRP-Exos 之间的通讯中起着重要作用。在我们的实验中，我们发现 PRP-Exos miR-26b-5p 通过抑制 NET 有效改善了糖尿病伤口愈合。进一步的测试验证了 miR-26b-5p 通过靶向 MMP-8 对 NET 的抑制作用。体外和体内实验均表明，PRP-Exos 中的 miRNA-26b-5p 通过靶向 MMP-8 减少中性粒细胞浸润，从而促进伤口愈合。这项研究确定了 miR-26b-5p 在 DFU 和PRP-Exos 之间的通讯中的重要性，通过靶向 MMP-8 破坏糖尿病伤口中的 NET 形成。这些发现为开发新的治疗策略以增强 DFU 患者的伤口愈合提供了宝贵的见解。

11.Healthy Tendon Stem Cell-Derived Exosomes Promote Tendon-To-Bone Healing of Aged Chronic Rotator Cuff Tears by Breaking the Positive-Feedback Cross-Talk between Senescent Tendon Stem Cells and Macrophages through the Modulation of Macrophage Polarization.

健康肌腱干细胞衍生的外泌体通过调节巨噬细胞极化来打破衰老肌腱干细胞和巨噬细胞之间的正反馈串扰，促进老年慢性肩袖撕裂的肌腱至骨愈合。

[Small] PMID: 38459643

摘要：肩袖撕裂 (RCT) 手术修复后的再次撕裂率很高，尤其是患有慢性撕裂的老年患者。衰老肌腱干细胞(s-TSC) 通常存在于老化和慢性撕裂的肩袖肌腱中，与肌腱-骨愈合结果受损密切相关。本研究发现 s-TSC 和巨噬细胞之间存在正反馈串扰。来自 s-STC 的条件培养基 (CM) 可促进巨噬细胞极化，主要朝向 M1 表型，而 M1 表型的 CM 反过来又加速了s-TSC 的进一步衰老。额外的健康肌腱干细胞衍生的外泌体 (h-TSC-Exos) 可以通过将巨噬细胞极化从 M1 表型偏向 M2 表型来打破这种正反馈串扰，从而减弱 s-TSC 衰老。RNA测序分析显示，M1或M2巨噬细胞诱导的S-TSC衰老加速或衰减效应与骨形态发生蛋白4信号通路的抑制或激活有关。使用老年慢性肩袖撕裂大鼠模型，发现h-TSC-Exos可以在术后急性期将肌腱-骨界面的微环境从促炎型转变为抗炎型，改善肌腱-骨愈合结果，这与恢复活力的s-TSC有关。因此，本研究提出了一种改善老年慢性RCT愈合的潜在策略。

今天的整理就到这里。希望大家可以有所收获。大家下周见！

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